简化Transfection-Grade质粒DNA的制备

用途Endotoxin-Free质粒纯化试剂盒

使用endotoxin-free质粒纯化工具去除污染类毒素在质粒DNA的提取大肠杆菌。木糖醇,也被称为脂多糖或有限合伙人,大多数革兰氏阴性细菌的细胞膜的组成部分。这个分子是细菌的实用目的,因为它有助于保护细胞壁的完整性和维护一个跨膜稳定微分细菌。有限合伙人不可或缺的细胞生存,缺乏有效地杀死细胞,防止其删除除了几株细菌。由于其在革兰氏阴性细菌无处不在,大多数真核生物的免疫系统识别类毒素和反应强烈的免疫反应。此外,由于化学结构的有限合伙人及其趋势形成胶束,它经常copurifies DNA在传统的质粒制备过程中工作流。因此,木糖醇的纯化质粒的存在与哺乳动物系统研究的一个重大问题,因为它可以极大地影响细胞行为,甚至导致细胞死亡,如果期间推出的转染。因此,endotoxin-free质粒纯化设备是必要的,当准备使转染哺乳动物细胞或组织与质粒DNA质粒DNA。

通常Endotoxin-Free质粒纯化怎么样?

传统上,endotoxin-free质粒纯化使用氯化铯密度梯度离心法(中海)。然而,这种方法需要使用危险试剂和昂贵的超速离心。此外,密度梯度离心法,相分离,酒精沉淀步骤冗长而乏味的执行和容易出错。通常情况下,大量的DNA是失去了在中海提取。净化的过程endotoxin-free质粒DNA后来改进的阴离子交换基于列endotoxin-free质粒纯化。这些类型的endotoxin-free质粒纯化工具大大减少所花费的时间和数量的步骤准备endotoxin-free质粒DNA与中海密度梯度离心法相比,但是他们通常还需要几个小时才能执行,因为他们依靠重力流缓慢列最初纯化质粒DNA和多个漫长的离心步骤进一步清理和集中筛选了质粒DNA。

我们开创了快速、高效endotoxin-free质粒纯化试剂盒的介绍ZymoPURE质粒纯化产品系列。这个家庭的质粒纯化工具功能专利绑定化学,使简单的净化高度集中(6毫克/毫升)使用spin-column endotoxin-free质粒DNA。streamlined工作流消除重力流缓慢阴离子交换柱和异丙醇沉淀步骤中发现其他工具。ZymoPURE质粒纯化试剂盒所花费的时间净化endotoxin-free质粒减少到9 x使用真空歧管或离心机。简单的绑定,洗,洗提转染准备,endotoxin-free质粒在几分钟内。

ZymoPURE质粒纯化试剂盒进行优化,确保筛选了DNA是免费的木糖醇,盐,蛋白质和RNA,导致质粒,适用于敏感的应用程序。结果endotoxin-free质粒DNA转染的理想(包括敏感和主细胞),CRISPR-Cas9和基因编辑、慢病毒载体、腺病毒载体,AAV载体,基因治疗,嵌合抗原受体(汽车)代重组抗体生成,在体外转录和翻译、合成生物学、PCR、转基因生物发电和显微镜下注射、分子克隆、限制性内切核酸酶消解时,定点诱变,质粒转化细胞,主管Sanger测序和其他敏感的下游应用程序。

我需要一个Endotoxin-Free质粒纯化设备吗?

标准和endotoxin-free质粒纯化套件都将准备质粒DNA大肠杆菌文化,适合各种下游应用程序。木糖醇不会影响许多常规的分子生物学技术,如改变细菌和酵母、DNA测序、聚合酶链反应、限制性内切酶消解时,结扎,吉布森大会,和金门组装,所以endotoxin-free质粒纯化工具并不总是必要的。然而,当将质粒引入对木糖醇的生物系统敏感,如哺乳动物细胞或组织,必须使用一个endotoxin-free质粒纯化设备准备引起内毒素的质粒DNA低,所以实验和结果并不是由。同时,并不是所有的标准质粒纯化工具创建同样的,和一些可能更容易的结转其他污染物,如盐、蛋白质和RNA,这也将损害多种分子生物学技术。因此,自endotoxin-free质粒纯化工具通常优化生产最高质量的质粒,他们通常是最安全的押注准备任何敏感的质粒DNA下游应用程序。