ZymoBIOMICS DNA Miniprep工具包
| 猫# | 的名字 | 大小 |
|---|---|---|
| D4300 | ZymoBIOMICS DNA Miniprep工具包(裂解管) | 50个家庭作业 |
| D4300T | ZymoBIOMICS DNA Miniprep工具包 | 5准备功课 |
| D4304 | ZymoBIOMICS DNA Miniprep工具包(没有溶解矩阵) | 50个家庭作业 |
文档
突出了
- 验证无偏微生物组的测量:公正的细胞裂解使用ZymoBIOMICS微生物群落标准进行验证。
- Inhibitor-Free DNA样本:任何下游应用程序隔离超纯DNA准备。
- 认证的微生物污染水平低:提高你的检出限低丰度的微生物。
描述
| 适用于 | 所有敏感的下游应用程序如qPCR和下一代测序。 |
|---|---|
| 洗脱体积 | ≥50µl DNA洗脱缓冲或DNase自由水 |
| 设备 | 微型离心机,涡/粉碎机精灵,高速细胞粉碎机(推荐)。 |
| 处理体积 | 粪便≤200毫克、土壤≤250毫克,细胞≤100毫克(约等于2 x109细菌2 x108酵母、或2 x107哺乳动物细胞) |
| 纯度 | 高品质、inhibitor-free DNA。典型的A260 / A280≥1.8 |
| 样本来源 | 病毒,细菌,真菌,原生动物、藻类的线粒体,和宿主DNA有效隔绝粪便、土壤真菌/细菌细胞生物膜和水。 |
| 样品存储 | 筛选了DNA应该存储在≤-20°C。 |
| 尺寸范围 | 通常15 - 20 kb post-bead跳动。为了优化DNA完整性,收集样本DNA / RNA的盾牌。 |
| 补充信息 | |
| 类型 | 总DNA |
| 收益率 | 25µg总DNA可以筛选了为≥50µl |
Q1:的目的是什么Zymo-Spin III-HRC一步?
环境样品通常含有抑制剂如多酚、腐殖质/富啡酸,单宁,黑色素等影响PCR等下游应用程序。的Zymo-Spin III-HRC旨在消除这些DNA PCR抑制剂和不绑定。的Zymo-Spin III-HRC可以单独购买OneStep PCR抑制剂工具包(D6030)。
Q2:为什么我有低产量和/或低纯度?
检查样品类型和输入数量。低生物样品如拭子,一些土壤样本,水,空气预计收益率较低。高生物样品如粪便可能导致自旋专栏的重载。使用更少的输入可能提高产量。
确保样品完全均质。根据珠搅拌器使用,设置为每个样本可能需要优化。均化时间延长,看看产量提高。
应用加热洗脱缓冲(60 - 70°C)和允许洗脱缓冲孵化柱洗脱前几分钟。
确保DNA洗脱缓冲是直接添加到列矩阵。
低A260/230值可以由于处理问题(如转移列在清洗步骤)。减少试剂清洗缓冲移行,离心机列以最大速度洗脱前1分钟。
Q3:碎片列绑定步骤后,我应该做些什么来避免这种情况在未来?
自旋向下溶解产物和绑定缓冲混合物最大速度为5分钟,这将消除任何碎片不被旋转III-F过滤器。也避免在裂解碎片管传输溶解产物时,以最高速度旋转抨击后,1 - 3分钟。
第四季度:优化珠打条件有什么技巧?
我们验证包高速均质器和低速干扰。我们强烈建议用户优化珠打条件自己的工具。我们建议使用2 ml-tube适配器以确保珠跳动是有效的(不要使用泡沫制成的适配器)。您可以参考下优化裂解协议表文档的一些建议。
Q5:的目的是什么Zymo-Spin III-F过滤器吗?
这是删除任何溶解产物的碎片,干扰DNA结合二氧化硅膜的列。
| 猫# | 的名字 | 大小 | ||
|---|---|---|---|---|
| C1058-50 | Zymo-Spin III-HRC过滤器 | 50包 | ||
| S6012-50 | ZR BashingBead裂解管(0.1 & 0.5毫米) | 50管 | ||
| C1078-50 | Zymo-Spin IICR列 | 50包 | ||
| D4300-1-40 | ZymoBIOMICS裂解的解决方案 | 40毫升 | ||
| d4300 - 2 - 100 | ZymoBIOMICS DNA结合缓冲区 | 100毫升 | ||
| D4300-3-50 | ZymoBIOMICS DNA洗缓冲区1 | 50毫升 | ||
| D4300-7-30 | ZymoBIOMICS HRC准备解决方案 | 30毫升 | ||
| D4300-4-60 | ZymoBIOMICS DNA清洗缓冲2 | 60毫升 | ||
| D4302-5-1 | ZymoBIOMICS DNase /核糖核酸酶游离水 | 1毫升 | ||
| D4302-5-10 | ZymoBIOMICS DNase /核糖核酸酶游离水 | 10毫升 | ||
| C1057-50 | Zymo-Spin III-F过滤器 | 50包 | ||